由中國認(rèn)證認(rèn)可協(xié)會檢測分會、天津分析測試協(xié)會標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)與檢測技術(shù)分會、天津阿爾塔科技有限公司與我要測網(wǎng)聯(lián)合主辦的“阿爾塔有約-精彩演繹 實力綻放”食品安全在線系列研討會，于6月21日圓滿舉辦第二期。會后，參與網(wǎng)友提出若干問題。阿爾塔科技將網(wǎng)友問題進行了篩選和整合，并與專家及時溝通。

現(xiàn)將問答內(nèi)容集中呈現(xiàn)。

一、中國工程院院士，中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院院長沈建忠問題答疑

1、硝基呋喃類和瘦肉精類現(xiàn)在有QUECHERS法嗎？

回答：硝基呋喃類代謝物和β-受體激動劑類藥物的樣品前處理方法要求比較高，現(xiàn)在方法已經(jīng)很成熟，在標(biāo)準(zhǔn)方法中都是應(yīng)用經(jīng)典方法，在文獻報道中有QuEChERS的方法。

2、目前在獸藥檢測技術(shù)上還有那些要改進的地方？

回答：主要還是樣品前處理方法需要突破，實現(xiàn)多類獸藥的高通量測定。

3、標(biāo)準(zhǔn)中對同一種獸藥經(jīng)常使用不同標(biāo)記的內(nèi)標(biāo)，是什么原因？

回答：只要是穩(wěn)定同位素標(biāo)記的內(nèi)標(biāo)，效果是一樣的，可能的原因是價格和來源。

4、獸殘測定質(zhì)控樣品制備的關(guān)鍵點和難點是什么？

回答：質(zhì)控樣品制備首先要獲得空白樣品，然后設(shè)計好陽性添加樣品的濃度，最好能夠同時包括試劑空白樣品。

5、獸殘多殘留測定國標(biāo)方法預(yù)計什么時候出來？

回答：2021年頒布的36項獸藥殘留國標(biāo)中有四環(huán)素類、磺胺類和喹諾酮類的多殘留方法，多類藥物的篩選方法正在制定，估計近幾年會有結(jié)果。

6、哪些場景下用小型質(zhì)譜儀比較合適？

回答：現(xiàn)場檢測需要用到小型質(zhì)譜儀，但是目前還沒有已經(jīng)市場化同時性能指標(biāo)優(yōu)秀的小型質(zhì)譜儀。

7、為什么一定用乙腈提?。靠梢杂眉状?，乙醇等低毒性溶劑提取獸藥分子嗎？

回答：獸藥的提取溶劑選擇多樣，可以用有機溶劑（甲醇、乙腈等），也可以用緩沖液等極性溶劑。

8、德國一個實驗室使用SCIEX液質(zhì)（低分辨質(zhì)譜）做出來了五百多種生物毒素同時測定，有相關(guān)配套標(biāo)準(zhǔn)立項嗎？

回答：多類獸藥檢測的篩選方法已有標(biāo)準(zhǔn)立項。

9、高分辨質(zhì)譜x500r跟普通三重四級桿有哪些優(yōu)勢？

回答：高分辨TOF與三重四極桿是兩種類型的儀器，分別側(cè)重于精確質(zhì)量的全掃描篩查和準(zhǔn)確定量的靶向檢測。

10、獸藥殘留檢測樣本前處理的難點在哪里？

回答：現(xiàn)階段多類獸藥殘留檢測的難點在于不同類獸藥的理化性質(zhì)差異較大，在提取和凈化步驟中難以兼顧；另外有些種類的獸藥需要檢測蛋白結(jié)合狀態(tài)的藥物或代謝物，也會增加多類獸藥同時檢測的難度。

二、天津阿爾塔科技公司創(chuàng)始人、董事長、首席科學(xué)家 張磊博士問題答疑

1、溶解性質(zhì)不同的獸殘在配制標(biāo)液的過程中的注意事項。

回答：溶解性是配制標(biāo)液時要考慮的問題之一，其次還要保證組分的穩(wěn)定性、檢測方法等眾多因素。將不同的組分配制成混標(biāo)時還要考慮這些組分是否能溶解到同一種溶劑中等因素。

2、穩(wěn)定同位素標(biāo)準(zhǔn)品是否可以定制？

回答：可以。阿爾塔目前可提供的農(nóng)藥、獸藥、醫(yī)藥、食品、環(huán)境、臨床等穩(wěn)定同位素標(biāo)記內(nèi)標(biāo)物1700余種，常用的農(nóng)獸藥內(nèi)標(biāo)物都實現(xiàn)了國產(chǎn)化或在研發(fā)計劃中，您可以先咨詢我們的銷售人員您需要的產(chǎn)品是否已經(jīng)在庫存目錄中，如果沒有的話原則上可以定制。

3、未來獸殘檢測領(lǐng)域，穩(wěn)定同位素標(biāo)記產(chǎn)品所占比重趨勢如何？

回答：我認(rèn)為趨勢是增加的。

4、未來的質(zhì)譜檢測中，哪些目標(biāo)物合成具有優(yōu)勢？

回答：這個問題很難有統(tǒng)一的答案，我認(rèn)為只要有檢測需要的化合物就有合成的需要。

5、貴公司當(dāng)前的獸藥標(biāo)記產(chǎn)品中，自研產(chǎn)品比重如何？將來的投入規(guī)劃？

回答：常用的獸藥內(nèi)標(biāo)基本上都是自研的，更多標(biāo)記產(chǎn)品的研發(fā)將根據(jù)市場需求確定，我們的目標(biāo)是讓客戶從"有什么用什么"轉(zhuǎn)變?yōu)?quot;想用什么有什么"、"沒什么做什么"。

6、呋喃它酮-D5，標(biāo)液經(jīng)過衍生化前處理，跟樣品中的對比，有時候峰型，響應(yīng)不太好。排除流動相問題，請教可能是前處理哪個環(huán)節(jié)的原因？

回答：我揣測您想問的可能是呋喃它酮代謝物-D5（AMOZ-D5）的衍生化，因為呋喃它酮-D5本身不需要進行衍生化。峰型不好可能是檢測方法的問題；響應(yīng)不好可能有以下幾個方面的原因，或者是質(zhì)譜條件不合適造成質(zhì)譜響應(yīng)低，或者衍生化反應(yīng)不完全造成衍生化產(chǎn)物濃度低，或者衍生化產(chǎn)物損失較大沒有完全回收。在您的實驗中究竟是什么原因需要一步一步的仔細(xì)排查，在沒有詳細(xì)的實驗記錄和實驗數(shù)據(jù)的情況下我也很難判斷。如果您用的是阿爾塔的產(chǎn)品，可以與我們的技術(shù)支持人員溝通。

7、氘代和C同位素替代那個更有優(yōu)勢？

回答：各有優(yōu)勢，氘代的價格更低，碳13標(biāo)記的穩(wěn)定性更好一些，根據(jù)具體應(yīng)用選擇吧。

8、獸藥標(biāo)記產(chǎn)品的研制難點和壁壘都有哪些？

回答：每一種獸藥內(nèi)標(biāo)都要單獨合成，難點各不相同。

9、在磺胺類測定方面有哪些創(chuàng)新點值得去深挖研究？

回答：我們聚焦在純品、單標(biāo)和混標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液的研究，也研究與產(chǎn)品對應(yīng)的檢測方法，對基體中磺胺類化合物的檢測未作深入探索。我認(rèn)為與其他農(nóng)獸藥相同，磺胺類化合物的檢測不應(yīng)只看母體，還應(yīng)考慮不同代謝途徑產(chǎn)生的代謝物，準(zhǔn)確定量可能還需要對應(yīng)的同位素標(biāo)記內(nèi)標(biāo)。

10、13C,18O,15N的原材料是否還很貴重，目前這些原材料是否主要掌握在國外公司？

回答：碳-13的原料目前仍由國外提供，氧-18和氮-15的應(yīng)該有國產(chǎn)化的，不清楚價格是否比進口的有優(yōu)勢。

11、穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)的優(yōu)勢？

回答：穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)用于同位素稀釋法對目標(biāo)物進行準(zhǔn)確定量，減少基質(zhì)效應(yīng)對檢測的干擾。

三、中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所孫雷研究員問題答疑

1、《食品安全法》實施以后，獸藥殘留檢測的標(biāo)準(zhǔn)以GB形式發(fā)布的較少，以前的GB/T、農(nóng)業(yè)部等標(biāo)準(zhǔn)是否可以采納？

回答：《食品安全法》實施以后，獸殘檢測方法標(biāo)準(zhǔn)以GB形式發(fā)布的目前已經(jīng)有74個，之前以GB/T、農(nóng)業(yè)部公告等形式發(fā)布的方法標(biāo)準(zhǔn)仍然有效，仍然可以采納。

2、GB開頭的標(biāo)準(zhǔn)色譜條件，前處理過程是否允許偏離？

回答：殘留檢測方法標(biāo)準(zhǔn)在實驗室使用之前，一般是要根據(jù)自身儀器設(shè)備的配備情況進行方法學(xué)驗證，轉(zhuǎn)化成本實驗室的SOP，然后根據(jù)SOP進行樣品檢測的。標(biāo)準(zhǔn)中的儀器條件，包括色譜條件和質(zhì)譜條件一般都是參考條件，可以根據(jù)自己實驗室儀器進行適當(dāng)調(diào)整。前處理過程中不是關(guān)鍵步驟，在經(jīng)過數(shù)據(jù)考察在不影響檢測結(jié)果的情況下，也是可以適當(dāng)調(diào)整的。

3、很多獸藥有葡萄糖苷代謝物形式存在，建立方法時無法判定酶解效果。如果有基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，是不是更可靠？

回答：有些獸藥在動物體內(nèi)代謝時會發(fā)生葡萄糖醛苷或硫酸芳基II相軛合反應(yīng)，檢測時需要通過酶解將結(jié)合態(tài)釋放為游離態(tài)，酶解前后藥物含量差異大小需要借助藥物飼喂動物后得到的活體動物樣品檢測得到，如果基質(zhì)標(biāo)物是通過飼喂動物得到，是可以使用的。

4、目前，想申請參與獸藥殘留檢測方法標(biāo)準(zhǔn)的研制工作，是什么樣的流程？怎么申請？

回答：想申請參與獸殘檢測方法標(biāo)準(zhǔn)的研制工作，首先要根據(jù)本實驗室工作內(nèi)容和已有工作基礎(chǔ)，找到農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)制定和修訂項目指南中適合的項目，向全國獸藥殘留專家委員會辦公室提交項目申報書，包括項目實施方案。

5、非靶向檢測方法能成為國標(biāo)嗎？

回答：多種類藥物的非靶向殘留檢測方法，在通過對方法靈敏度、線性、準(zhǔn)確度和精密度等一系列技術(shù)參數(shù)進行考察后，如果滿足法規(guī)要求，是可以成為國標(biāo)的，目前該類方法在肉、蛋、奶中開發(fā)的較多，肝臟、腎臟中較少。

6、獸藥殘留檢測方法標(biāo)準(zhǔn)研制過程中一般需要考察哪些技術(shù)參數(shù)？

回答：獸殘檢測方法標(biāo)準(zhǔn)研制過程中一般需要進行方法靈敏度（定量限）、線性、回收率和精密度等技術(shù)參數(shù)考察，看是否滿足法規(guī)要求。

7、在進行樣品中獸藥殘留檢測前，怎么選擇方法標(biāo)準(zhǔn)？

回答：選用檢測方法標(biāo)準(zhǔn)主要看方法的適用范圍，看是否包括所檢測樣品種類，然后看方法性能，如方法的靈敏度是否滿足要求，前處理過程是否簡便等。

8、肉蛋奶等動物性食品中獸藥殘留檢測結(jié)果是否合格，怎么判定？

回答：動物性食品中獸藥殘留檢測結(jié)果判定分為兩種情況：如果是禁用藥物、停用藥物或不得檢出的藥物，要根據(jù)藥物的判定限或方法定量限進行判定；如果藥物是允許使用但有最大殘留限量規(guī)定，要依據(jù)最大殘留限量進行判定。

9、同一化合物存在多個國標(biāo)，其檢測結(jié)果如果不一致，怎么處理。同理，如果化合物既有單殘留也有多殘留檢測標(biāo)準(zhǔn)，定量如何協(xié)調(diào)？

回答：多個檢測方法檢測同一化合物，理論上檢測結(jié)果應(yīng)該差別不大。要結(jié)合下達任務(wù)時推薦的方法標(biāo)準(zhǔn)以及本實驗室的已批準(zhǔn)參數(shù)方法而定。

10、國標(biāo)中食品安全檢測標(biāo)準(zhǔn)中的質(zhì)譜離子對（一般在標(biāo)準(zhǔn)中的資料性附錄中），是否容許偏離？

回答：獸藥殘留檢測方法標(biāo)準(zhǔn)中的定性定量離子對和儀器條件一樣，也是參考條件。要參考方法標(biāo)準(zhǔn)中的離子對，結(jié)合自身實驗室儀器配備情況選用響應(yīng)值較強的離子對即可。

四、SCIEX中國首席應(yīng)用專家李立軍問題答疑

1、SCIEX串聯(lián)四級桿定量的方案適合于所有系列的型號嗎？

回答：適合于3500-7500純串聯(lián)四級桿及QTRAP，個別型號僅需要微調(diào)一些參數(shù)。

2、高分辨篩查方法是否所有QTOF類儀器都可以用？

回答：所有QTOF儀器均可以參考，但因為SCIEX的QTOF速度足夠快，可以一針進樣同時采集到所有待篩查的化合物的二級質(zhì)譜，其他型號的儀器可能需要兩針進樣才行。

3、在QTRAP里，金剛烷胺干擾物質(zhì)怎么排除和區(qū)分？

回答：金剛烷胺有干擾具體要看數(shù)據(jù)才能分析，是兩對MRM均有，還是只有一對，保留時間是否穩(wěn)定，還是基線噪音高等。